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食蟹猴和恒河猴SARS感染模型

(1)复制方法  年龄为3~6岁的健康恒河猴(Rhesus macaques)和食蟹猴(M. fascicularis),按0.15ml/kg体重的剂量经肌肉注射速眠新麻醉,然后经鼻内和气管内感染SARS- CoV BJ01株(10的5.7次方TCID50/ml)。模型动物在攻毒后第2、5、7日的咽拭子均分离出病毒,经**荧光鉴定为SARS病毒。部分感染猴的肺部有出血点或出血斑。所有感染猴均可出现不同严重程度的多灶性单核细胞性间质性肺炎,表现为肺泡间隔增宽、出血、渗出,肺泡腔内有脱落的肺泡上皮细胞和巨噬细胞,小支气管和细支气管也有上皮细胞脱落;部分肺泡间隔出现少量以**细胞为主的炎症细胞浸润,肺泡腔内偶见透明膜形成。**组化可在肺泡巨噬细胞和Ⅰ型上皮细胞中检测到SARS病毒抗原。感染动物尸检中,在支气管**结和心肌中均能检测到病毒RNA,并有炎症改变。多数模型动物出现多灶性**细胞性感染为主的肝炎,并伴有个别肝细胞坏死。

(2)模型特点  模型动物感染后出现病理学的改变,肺脏是病毒感染的主要靶器官,各肺叶均可见弥漫性肺泡损伤,形成透明膜,出现单核细胞浸润。通过病毒学检测及**学方法可从模型动物血、咽拭子、肺泡上皮细胞和支气管**结等组织样品中检测到SARS病毒RNA,说明病毒能在非灵长类动物体内复制;并且有机体体液和细胞**应答。部分感染猴的白细胞和血小板数量从感染第3日起出现一过性的降低,然后逐渐恢复到正常的水平;动物体内产生SARS病毒的专一性抗体,感染后第2、3、4周的血清抗 SARS-CoV特异性抗体水平均较高。由此可见,恒河猴可作为SARS病毒感染的动物模型,适用于SARS发病机制、**筛选、疫苗评价的研究。

(3)比较医学  所有感染猴均未观察到如高热、干咳、昏睡、一过性的皮疹和呼吸困难等SARS典型临床症状,有2/3的恒河猴出现一过性的低热;而所有食蟹猴的体温均在正常的范围内波动。但感染猴的肺组织病理变化,如弥漫性肺泡损伤、单核细胞浸润等均与人类感染SARS冠状病毒后的肺组织病变基本类似,且病理变化较人类轻。感染后模型动物体内可产生SARS专一性抗体,感染4周左右时其血清中的抗体水平较高,这与人类SARS患者相同;SARS患者体内产生的特异性IgM抗体,从7d开始出现至第11日可达到高峰;而IgG抗体则于10d后产生,至20d达到高峰;同时从感染猴的组织和分泌物中分离到病毒。总之,恒河猴感染SARS病毒的病理学改变与人类感染SARS病毒后出现的病理改变十分相似,且非人灵长动物具有与人相似的遗传背景,所以可成为较为理想的SARS动物模型。但受到客观条件的限制,猴无法在大规模的研究中使用,这种限制降低了本模型的应用价值。

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